Introduction

Le virus de l'hépatite C (VHC) infecte environ 170 millions de personnes dans le monde. L'infection devient chronique dans 70 à 80 % des cas, pouvant mener à une cirrhose ou une stéatose hépatique. La protéine de capside du VHC, connue pour se lier aux gouttelettes lipidiques cytoplasmiques (Barba et al., 1997), est capable à elle seule d'induire la stéatose (Yamaguchi et al., 2005). Par ailleurs, des particules virales sont associées aux lipoprotéines riches en triglycérides, donnant ce que l'on appelle des LipoViroParticules (LVP). Ces LVP sont d'origine hépatique et entérocytaire, et des protéines non structurales du VHC ont été détectées dans les entérocytes de patients suggérant ainsi que l'intestin pourrait être un réservoir pour le virus (Desforges et al., 2004 ; Diaz et al., 2006). L'objectif de ce travail est d'étudier l'effet de la protéine de capside sur le métabolisme lipidique intestinal et, en particulier, les mécanismes de partition des triglycérides entre le compartiment sécrétoire et le stockage cytoplasmique. Nous utilisons à cet effet des cellules Caco-2/TC7, clone de la lignée entérocytaire Caco-2, capables d'absorber des lipides par leur pôle apical et de sécréter des lipoprotéines riches en triglycérides en fonction de l'apport en nutriments (Château et al., 2004).
 

 Résultats

Nous avons transfecté des cellules Caco-2/TC7 avec un plasmide codant pour la protéine de capside couplée à la Green Fluorescent Protein (GFP). Les transfections transitoires ont permis de visualiser la protéine de capside dans un compartiment subcellulaire correspondant vraisemblablement au réticulum endoplasmique. Elle a également pu être observée en périphérie des gouttelettes lipidiques cytoplasmiques. Nous avons sélectionné les cellules GFP-positives et obtenu une population exprimant la protéine de capside de manière stable après confluence. Sa localisation subcellulaire est la même que celle observée en transfection transitoire. Le clonage à partir de cette population a mené à l'obtention de plusieurs clones exprimant la protéine de fusion à des taux différents. Après apport de micelles lipidiques ces clones montrent une diminution de la sécrétion de triglycérides et d'apolipoprotéine B, sans modification de la quantité intracellulaire de lipides, ce qui suggère une réduction de la sécrétion de lipoprotéines.
 

 Discussion

Le travail en cours consiste à préciser les modifications de la composition des lipoprotéines et à identifier, par analyse protéomique, des protéines des gouttelettes lipidiques dont l'expression serait modifiée par la protéine de capside, ceci dans l'optique d'élucider leur fonction dans le stockage ou la sécrétion des triglycérides.
 

 Conclusion

Ce travail conduira à préciser la régulation de la partition des lipides dans l'entérocyte et à éclaircir le rôle de l'intestin dans le cycle du VHC au cours de l'infection.