Résumé selectionné

Un stress aigu expérimental augmente la perméabilité para cellulaire intestinale et colique par un mécanisme impliquant les mastocytes. Ces altérations liées au stress entraînent un état pro-inflammatoire au niveau de la muqueuse, retrouvé dans certaines pathologies fonctionnelles de l'intestin. La microflore intervient dans les régulations de l'immunité muqueuse. Le rôle des bactéries dans la régulation de la perméabilité para cellulaire n'a cependant jamais été établi. A partir d'un modèle d'augmentation de la perméabilité para cellulaire colique induite par un stress ou une activation pharmacologique des mastocytes, notre objectif était de déterminer si la microflore pouvait être impliquée dans les altérations de la barrière épithéliale.

Des lots de souris Swiss mâles (20-25 g) ont été traités par l'association de 2 antibiotiques (ATB) : ampicilline et néomycine (0,05 % et 0,1 % respectivement) pendant 10 jours. La perméabilité para cellulaire colique a été déterminée en perfusant du 51Cr-EDTA (0,7 µCi ; 250 µL/h) par voie intracolique pendant 2 heures et est exprimée en % de la radioactivité retrouvée dans le reste du corps. Deux lots de 8 souris (dont un sous ATB) ont été soumis à un stress aigu pendant 2 heures (stress de contention + acoustique) ; 2 autres lots (dont un sous ATB) ont reçu un dégranulateur mastocytaire, le BrX-537A (2 mg/kg ; IP). Ces 4 lots ont été sacrifiés trois jours plus tard afin d'évaluer la perméabilité para cellulaire colique. Enfin, une cinétique d'expression protéique de l'IFNg par dosage ELISA au niveau de la muqueuse colique a été réalisée avec 12 lots traités (dont 6 sous ATB) par le BrX-537A.

Une session unique de stress ou un traitement par le BrX-537A entraîne après le troisième jour, une augmentation de la perméabilité para cellulaire colique de 287 % et 231 % respectivement (p < 0,001 vs témoin). L'expression protéique de l'IFNg augmentait de 142 %, 3 jours après l'administration du BrX-537A (528 ± 72 vs 213 ± 20 pg/mg de protéines totales, p < 0,05). Sous traitement ATB, ni le stress (1,12 ± 0,20 %), ni la dégranulation des mastocytes (0,78 ± 0,20 %) ne modifiaient la perméabilité para cellulaire colique par rapport aux lots contrôles. De plus, les ATB n'avaient pas d'effet propre sur la perméabilité par rapport aux lots contrôles. Enfin, le BrX-537A n'induisait plus d'augmentation à 3 jours de la production d'IFNg (340 ± 40 pg/mg de protéines vs contrôle 246 ± 39 pg/mg de protéines) après le traitement par ATB.

Nos résultats démontrent que la flore colique a un rôle prépondérant dans l'augmentation tardive (3 jours) de la perméabilité colique liée à un stress aigu ou à la dégranulation des mastocytes. De plus, la stimulation du système immunitaire muqueux, attestée par l'augmentation de la sécrétion d'IFNg est également inhibée par un traitement ATB. La microflore colique possède donc un rôle permissif pour la sécrétion d'IFNg et l'augmentation de la perméabilité liée au stress ou à une dégranulation mastocytaire.