Résumé selectionné

	mardi 6 avril 2004
	Poster

Lignage hépatique des cellules souches d'origine hémangioblastique

C Benbrahem⁽²⁾ , D Couton⁽²⁾ , O Soubrane⁽¹⁾ , H Gilgenkrantz⁽²⁾ , VO Mallet⁽²⁾

⁽¹⁾ Laboratoire de Recherche Chirurgicale EA1833, Thérapeutiques Innovantes des Maladies du Foie., Paris
⁽²⁾ GDPM, Institut Cochin, Paris

Mots clés :
90 Cellules Souches, Régénération
30 Cholestase
43 Cirrhose

Introduction

L'origine des myofibrobastes au cours du processus fibrotique est mal connue. Une des hypothèses est qu'ils pourraient avoir une origine médullaire. Le récepteur Tie-2 est un marqueur de cellules endothéliales, de leurs précurseurs et d'une certaine proportion de cellules médullaires. Nous avons cherché à tracer les cellules exprimant ce marqueur au cours d'un processus physiopathologique de type fibrotique sur un modèle de souris après ligature de la voie biliaire principale.

Matériels et Méthodes

Nous avons utilisé un modèle de lignage cellulaire in vivo permettant de suivre les cellules ayant exprimé le marqueur Tie-2 même si celles-ci ont changé de destin ou se sont transdifférenciées. Cette approche est basée sur le croisement de deux lignées d'animaux l'une exprimant la recombinase Cre sous le contrôle du promoteur Tie-2 et l'autre exprimant la beta galactosidase uniquement après action de la recombinase Cre.

Le foie de 8 animaux double transgéniques a été étudié pour l'expression de la beta galactosidase, 1 semaine (n = 4) et 4 semaines (n = 4) après ligature de la voie biliaire principale (LVB). 4 animaux non transgéniques ayant subi le même traitement chirurgical et 4 animaux double transgéniques sans ligature ont servi de contrôle.

Résultats

Chez les animaux double transgéniques non opérés, seules les cellules endothéliales du foie ainsi que quelques cellules d'origine hématopoiétique sont marquées. Aucun marquage n'est observé chez les animaux non transgéniques 4 semaines après la fibrose.

Après ligature et section de la voie biliaire principale en revanche, de nombreuses cellules marquées sont mises en évidence au sein de la fibrose chez les animaux double transgéniques. Cette expression augmente parallèlement à la fibrose entre 1 et 4 semaines. Une étude immuno histochimique et la réalisation de co marquages permettent de confirmer que ces cellules marquées sont CD34 positives (marqueur large des cellules endothéliales des cellules étoilées et de cellules hématopoïétiques), essentiellement CD31 négatives (marqueur de l'endothélium) et certaines d'entre elles sont positives pour l'alpha actine musculaire lisse. Cette dernière population est présente dans la fibrose péri portale mais également dans la paroi des vaisseaux portes.

Conclusion

Une proportion importante de la population myofibroblastique péri portale qui prolifère rapidement après ligature des voies biliaires provient d'un progéniteur Tie-2 positif. L'origine médullaire et la nature précise de ce progéniteur sont à démontrer.