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	Lundi 31 mars 2003
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	PA09

LA P-GLYCOPROTEINE ET NON LE CYP3A4 LIMITE L'ABSORPTION INTESTINALE DE SAQUINAVIR

⁽¹⁾ S Mouly, ⁽²⁾ MF Paine, ⁽²⁾ PB Watkins
⁽¹⁾Médecine Interne A, Hôpital Lariboisière, Paris
⁽²⁾GCRC, University of North Carolina, CB#7600, Chapel Hill, NC, USA

Mots clés :
16 Biologie De L'entérocyte,Transport Épithélial, Absorption
17 Malabsorption
52 Infections Par Le Vih, Sida

Buts

La faible biodisponibilité (1 à 4 %) de saquinavir (SQV) est liée à un effet de premier passage intestinal important [1]. Nous souhaitions determiner la contribution relative du métabolisme (par le CYP3A4) et du transport (par la P-gp) intestinal dans la limitation de biodisponibilité du SQV.

Méthodes

Des cellules cancéreuses intestinales Caco-2 exprimant constitutivement de la P-glycoprotéine (P-gp) à leur pôle apical ont été traitées par 0,5 µM de 1&agr;-25 (OH)2 vitamine D3 pour induire l'expression de CYP3A4. Le SQV, à une concentration supposée saturer le CYP3A4 (20 mM vs Km ~ 0,5 µM sur fraction microsomes intestinaux), était incubé pendant 3 heures au pôle apical (AP) ou basolatéral (BL) de la monocouche cellulaire. L'effet d'un inhibiteur spécifique de la P-gp intestinale (LY335979, 0, 5 mM) incubé au pôle AP et de l'&agr;1-glycoprotéine acide (AAG, 1g/L) incubée au pôle BL ont été également examinés. Les compartiments AP, BL ainsi que le contenu cellulaire en SQV et son principal métabolite M7 ont été analysés par HPLC.

Résultats :

Le ratio d'efflux moyen de SQV (BL-to-AP/AP-to-BL) diminuait de 44 ± 30 sans, à 3,3 ± 1 avec l'inhibition de la P-gp par LY335979 (P = 0,04, test U de Mann-Whitney). La production maximum de M7 dans chaque puits de culture (58 ± 11 pmoles/h) était presque 20 fois moindre que ce que nous avions anticipé (4 nmoles/h) sur la base d'études réalisées sur fraction microsomes intestinaux. De plus, la production de M7 n'était pas corrélée au contenu cellulaire de SQV, mais augmentait lorsque le flux transcellulaire de SQV augmentait.

Conclusions

P-gp était le principal facteur contribuant à l'effet de premier passage intestinal de SQV dans notre modèle et le métabolisme intestinal de SQV par le CYP3A4 était surestimé sur fractions microsomes comparé à nos résultats. Nous pensons que l'étape limitante du métabolisme intestinal in cellulo est la présentation du substrat à l'enzyme pour des molécules à turn-over élevé tels que le saquinavir, la ciclosporine ou encore la terfénadine.

1. Barry et al. Clin Pharmacokinet 1997 ; 32 : 194-209.

Gastroentérologie clinique & biologique 2003; 27, HS1, 0399-8320